储存温度： -20℃
来源 ： 重组TEV蛋白酶，基因工程生产，大肠杆菌表达。
产品简介：
重组TEV蛋白酶（His标签）是烟草花叶病毒小核体蛋白a催化结构域基因编码的经高度纯化的制剂，该酶的生物学功能是在病毒产生过程中将多蛋白体酶解为单一蛋白。和因子Xa、凝血酶相比，TEV酶是识别序列更加严格。做为生物工程下游技术中融合蛋白酶切使用的重要工具酶，TEV酶识别非常一致的7氨基酸序列：E-Xaa-Xaa-Y -Xaa-Q-P1’(G/S)，酶切发生在Q和P1’之间的肽键。最常用的7氨基酸序列是ENLYFQG。P1’位置可以是不同的小分子氨基酸，这样目标蛋白从融合蛋白的N端释放，带自然的N末端或者只多一个氨基酸的蛋白。该产品是经过了基因工程改造的蛋白酶，稳定性好，在广泛的温度范围具有特异性。本品来源于重组大肠杆菌，经过高度纯化，比活性达到10,000U/mg。最适酶切温度是30℃，但在4℃也具有酶活性。rTEV-H带His标签，酶切后可方便地通过Ni亲和柱层析去除。
产品特性
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中文别名（Chinese synonym） |
TEV蛋白酶 |
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英文别名（English synonym） |
TEV Protease |
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来源（Source） |
大肠杆菌表达 |
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标签（label） |
多聚His标签 |
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纯度（Purity） |
经SDS-PAGE及HPLC分析，纯度> 90% |
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分子量（Molecular weight） |
27 kDa |
缓冲液组分（Buffer）：25 mM Tris HCl，pH 8.0，50 mM NaCl，1 mM NaCl，1 mM TCEP和50%甘油
活力单位：在pH 8.0、温度30 °C条件下，一单位的TEV蛋白酶可在一小时内切割>85% of 3 μg的对照底物。
使用方法：
3.1. 在EP管中配制如下反应体系（建议）
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组分 |
体积 |
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融合蛋白 |
20 μg |
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10X TEV Protease Buffer |
20 μL |
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ddH2O |
to 190 μL |
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TEV Protease |
10 μL |
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Total volume |
200 μL |
3.2. 30℃孵育，在0.5、1、2、3小时分别吸出30 μL上述反应液，置于单独的EP管中。
3.3. 向上述EP管中加入30 μL 2×SDS Loading Buffer，置于-20℃。
3.4. 样品全部反应完毕后，样品煮沸5 min，取40 μL进行SDS-PAGE分析。确定最佳反应时间。
【注】如融合蛋白要求低温处理，可将反应液置于4℃，延长反应时间，并增加TEV酶用量，以保证酶切效果。
储存和运输稳定性：
储存稳定性：长期储存于-80℃，或解冻后保存于-20℃使用。
产品优势：
无动物源性：重组生产，无外源性的病毒污染，生产过程不使用任何动物源原料。
质量稳定：批量生产，可保证稳定连续的批次生产；产品批次间无差异，质量稳定。
纯度高：比活高；宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。
